Наночастицы gdyvo 4 :eu 3+ не стимулируют эриптоз в эксперименте in vitro.

Abstract

Одним из перспективных направлений использования наноматериалов в медицине является применение наночастиц на основе оксидов металлов и редкоземельных элементов в терапии онкопатологии. Основным лимитирующим фактором применения наночастиц в терапевтических целях является их цитотоксичность. Оценка интенсивности процессов эриптоза, т.е. запрограммированной гибели эритроцитов, активно применяется в токсикологии с целью определения цитотоксичности ксенобиотиков, в том числе и лекарственных препаратов. Существуют данные относительно прооксидантных свойств наночастиц GdYVO 4 :Eu 3+ , поэтому актуальным вопросом является изучение их влияния на процессы эриптоза при непосредственном воздействии. Целью исследования явилось изучение воздействия наночастиц GdYVO 4 :Eu 3+ на интенсивность процесса эриптоза. Эксперимент проводился на 9 половозрелых крысах популяции WAG, у которых забиралась кровь в вакутейнеры с ЭДТА. Кровь инкубировали горизонтально в 10 мл среды RPMI-1640 (Biowest, Франция) с натрий-фосфатным буфером (pH 7,4) или раствором наночастиц GdYVO 4 :Eu 3+ (80 мкг на мл) в течение 4 и 24 часов. Наночастицы GdYVO 4 :Eu 3+ (d=2 нм) синтезировались в Институте сцинтилляционных материалов НАН Украины (г.Харьков, Украина). Кровь дважды промывали с последующим добавлением 2 мкл эритроцитов к 100 мкл 1x буфера для связывания аннексина (BD Pharmingen TM Annexin V Binding Buffer, BD Biosciences, США) и 5 мкл аннексина V, меченного флуорохромом FITC (BD Pharmingen TM FITC-Annexin V, BD Biosciences, США). Полученные суспензии эритроцитов инкубировали 30 мин, избегая воздействия прямых солнечных лучей. Непосредственно перед анализом на проточном цитометре BD FACSCanto™ II (BD Biosciences, США) во все образцы добавляли 400 мкл 1x буфера для связывания аннексина. Критерий Крускала-Уоллиса и post-hoc критерий Данна использовали при статистическом анализе полученных результатов.