Наночастинки GdVO 4 :Eu 3+ у значних концентраціях знижують метаболічну активність фібробластів

Abstract

Вступ. Нанотехнології є перспективним напрямком розвитку сучасної медицини. Для ефективного застосування наночастинок в медицині необхідно перш за все дослідити їх токсичність. Інтегральним показником функції клітин є метаболічна активність, визначена за даними МТТ тесту, яка відображає кількість життєздатних клітин та активність мітохондрій. Метою дослідження було вивчення впливу наночастинок ортованадату гадолінію з домішками європію (GdVO 4 :Eu 3+ ) на метаболічну активність культури фібробластів. Матеріали та методи. Фібробласти виділяли зі шкіри плодів щурів 18-20 днів гестації ферментативним методом, культивували в середовищі DMEM з 10% фетальної сироватки у СО 2 -інкубаторі до 3 пасажу. Пересівали на 96- лунковий планшет у концентрації 10 тис. клітин на лунку, додавали наночастинки GdVO 4 :Eu 3+ у концентраціях 0-30-65-130-260-520 мкг/мл на одну добу, після чого лунки відмивали, проводили МТТ тест за стандартною методикою. Показники реєстрували на довжині хвилі 570 нм на планшетному спектрофотометрі. Статистичну обробку даних проводили шляхом розрахунку критеріїв Краскела-Уоліса та Данна. Результати дослідження. Встановлено, що культивування фібробластів протягом 24 годин з наночастинками GdVO 4 :Eu 3+ у концентраціях 30-65-130- 260 мкг/мл не призводило до статистично достовірних (р>0,05) змін метаболічної активності за результатами МТТ тесту у порівнянні з контролем (0 мкг/мл). Концентрація наночастинок 520 мкг/мл значно знижувала метаболічну активність цих клітин. Втім за даними наших попередніх досліджень концентрації наночастинок 130-260 мкг/мл впливають на інші показники функціонування клітинної культури фібробластів (форму клітин, конфлюентність моношару, проліферативну активність). При мікроскопічному дослідженні під час проведення МТТ тесту до екскреції формазану було виявлено, що навіть клітини, які повністю втратили адгезію та форму, активно продукують формазан. Висновки. Наночастинки GdVO 4 :Eu 3+ у значних концентраціях (520 мкг/мл) знижують метаболічну активність культури фібробластів in vitro.