Ультраструктурні та функціональні характеристики сперміїв людини після кріоконсервування методом вітрифікації

Abstract

Низькотемпературне консервування сперматозоїдів широко використовується при лікуванні безпліддя методами допоміжних репродуктивних технологій (ДРТ). Методи кріоконсервування сперматозоїдів із еякулятів при нормозооспермії є рутинними, проте їх неможливо використовувати для сперматозоїдів, отриманих із еякулятів при вадах сперматогенезу. Розроблення методів кріоконсервування та оцінка морфофункціональних та ультраструктурних характеристик сперматозоїдів після кріоконсервування є актуальними. У роботі оцінювали вплив кріоконсервування методом вітрифікації з використанням непроникальних кріопротекторів полівінілпіролідону (ПВП) та сахарози на морфофункціональний та ультраструктурний стан сперматозоїдів людини при патоспермії. У (22,3 ± 3,4), (26,8 ± 4,2), (18,6 ± 2,1)% сперміїв після вітрифікації з 0,25 М сахарозою; 10% ПВП та сумішшю 0,25 М сахарози, 10% ПВП, 10% сироваткового альбуміну людини відповідно, спостерігали виникнення вакуолей у хроматині ядер сперматозоїдів. Для свіжовиділених сперматозоїдів цей показник становив (16,6 ± 1,4)%. У досліджувальних групах ультраструктурні характеристики акросоми, аксонеми, периаксонемальних структур та джгутика сперматозоїдів суттєво не відрізнялися від контрольних зразків. Показано, що кріоконсервування сперматозоїдів людини методом вітрифікації з використанням розчинів сахарози та ПВП дозволяє зберегти їх життєздатність та ультраструктурну цілісність та є перспективним для використання у ДРТ.//////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////// Low temperature preservation of spermatozoa is widely applied in infertility treatment when using the assisted reproductive technology (ART). There are the standard methods for cryopreservation of ejaculated spermatozoa in normozoospermia, but their application for ejaculate-derived spermatozoa, having spermatogenesis defects, is impossible. Therefore, of high priority are to design the cryopreservation methods and assess morphofunctional and ultrastructural characteristics of spermatozoa after cryopreservation. Here, we have evaluated the impact of cryopreservation by vitrifi cation using non-penetrating cryoprotectants of polyvinylpyrrolidone (PVP) and sucrose on morphofunctional and ultrastructural state of human spermatozoa in pathospermia. In (22.3 ± 3.4), (26.8 ± 4.2), (18.6 ± 2.1)% of spermatozoa after vitrifi cation with 0.25M sucrose; 10% PVP and a mixture of 0.25 M sucrose, 10% PVP, 10% human serum albumin, respectively, we have observed the appearance of vacuoles in nuclear chromatin of spermatozoa. For freshly isolated spermatozoa this index was (16.6 ± 1.4)%. In the studied groups, the ultrastructural characteristics of acrosome, axoneme, periaxonemal structures, and spermatozoa fl agella did not signifi cantly diff er from the control samples. The cryopreservation of human spermatozoa by vitrifi cation using sucrose and PVP solutions was shown to preserve their viability and ultrastructural integrity and to be promising in ART.